Depuis longtemps, je cherchais à pouvoir suivre par exao l'évolution d'une population de levure au cours du temps.
Jusqu'à l'année dernière je travaillais avec le colorimètre de chez vernier, sans obtenir de résultats véritablement fiables. Les variations de mesure étaient cohérentes en partant d'une solution donnée, mais à chaque fois que l'on changeait de solution de départ, les résultats précédents devenaient caduques.
Cette année la société biolab, nous a prêté le spectrophotomètre "spectrovis" de la société VERNIER. J'ai donc testé ce matériel dans le cadre de cette expérience.
La calibration de cet appareil est simplissime, puisqu'il suffit de laisser préchauffer la lampe( une dizaine de secondes ). Il s'agit ensuite de mettre une cuve vide pour terminer l'étalonnage...
Pour faire ensuite une courbe étalon, il suffit de faire une solution de levure par exemple à 0.6gL-1 et de regarder la courbe d'absorbance en fonction de toutes les longueurs d'onde du spectre. Il s'agit, de regarder où l'on obtient la ou les meilleurs absorbances. Ensuite en fonction des longueurs d'onde définies, on peut établir plusieurs courbes étalon simultanément.
j'observe donc ici que la meilleur absorbance est à 407 nm, j'observe également deux évènements à 449 nm et 470 nm. J'ai donc fait les mesures à ces trois longueurs d'ondes.
voici le résultat obtenu :
on constate ainsi que la longueurd 'one de 407 nm est la plus cohérente. Lorsque l'on regarde la régression linéaire, le coefficient de corrélation est de 0.999. On peut donc utiliser cette courbe en guise d'étalon.
Laisser un commentaire
