Le programme de spécialité SVT propose dans la partie "autotrophie pour le carbone" de s'intéresser au spectre d'absorption de la photosynthèse.
J'ai relevé une activité intéressante dans le livre Belin de spé ancien programme, et je l'ai reproduite. C'est d'autant plus intéressant que cette activité reste dans le nouveau programme de TS spé version 2012.
L'activité est simple, il s'agit de réaliser dans un premier temps une chromatographie sur whatman.
d'après SNV jussieu.
Il s'agit là d'utiliser un protocole classique ( solvant :ether de pétrole, propanone)
écrasement de la feuille d'épinard sur le papier whatman à l'aide d'un agitateur en verre.(temps de migration :30 minutes environs sans déplacer la colonne).
IL faut ensuite utiliser un spectrophotomètre relié en USB au PC.
Faire une solution de chlorophylle brute :
trois feuilles d'épinard découpées sans la nervure centrale dans un mortier, un peu de sable de fontainebleau, 20 ml d'éthanol à 95°. Broyer fermement et assez longtemps. ( 5 min )Filtrer.Vous avez une solution de chlorophylle brute.
Lorsque vous la passez dans le spectro, elle peut apparaitre comme trop concentrée. ( saturation au niveau de l'absorption ) Il suffit de la diluer ( toujours avec de l'éthanol).jpg)

Le résultat de la chromatographie:
J'ai fait des dépôt très lourd, j'étais tout seul, ce qui n'est pas le cas de l'enseignant qui fait faire des chromatos à tous les binomes. On a donc normalement entre 9 et 11 chromatos à disposition. Il est donc inutile de faire comme moi. Des dépôts bien marqués mais plus léger donnent un résultat plus esthétique...

la chromatographie :

Il suffit maintenant de découper les différentes parties de notre chromatographie, d'en faire des petites bandelettes suffisamment fines pour qu'elles puissent infuser un petit quart d'heure dans une cuve à chromatographie remplie d'éthanol.
Le résultat obtenu dans les cuves :

Il ne reste plus ensuite qu'à passer les différentes cuves dans le spectrophotomètre.
Résultat obtenu :

On peut constater un défaut dans ce résultat :
La chlorophylle b emet également dans les mêmes longueurs d'ondes que la chlorophylle a. Je pense qu'en fait, il devait rester dans la partie du whatman que j'ai découpé un peu de chlorphylle a. Ceci expliquerait le spectre trop large de la chlorophylle b.
